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產(chǎn)品參數(shù)

英文名稱：Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA kit

產(chǎn)品規(guī)格：48/96T

保存方式：2-8℃避光防潮

有效期：6個(gè)月

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法

試劑的準(zhǔn)備

20X洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20X洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.自動(dòng)洗板機(jī)；每孔注入洗液350ML，浸泡1min,洗板5次。

操作步驟

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放加4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品也和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ML；

3.樣本孔先加待測(cè)樣本10ML，再加樣本稀釋液40ML；空白孔不加。

4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100ML，用封板膜封信反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min.

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA實(shí)驗(yàn)步驟：

1.標(biāo)本的采取和保存:

可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

2.試劑的準(zhǔn)備:

按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

3.加樣:

在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相。

人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA等更多 產(chǎn)品：

人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 Human Cystatin C,Cys-C ELISA kit

人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒 Human C4 binding protein,C4BP ELISA kit

大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA kit

人孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 Human progesterone receptor,PGR ELISA kit

大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 Rat deoxypyridinoline,DPD ELISA kit

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA kit

大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 rat Endothelin 1,ET-1 ELISA kit

人免疫球蛋白重鏈(IgH)ELISA試劑盒 Human immunoglobulin heavy chain,IgH ELISA kit

人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒 Human Proteoglycan,PG ELISA kit

大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA kit

(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 Rat 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA kit

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 Human hepatitis B virus X Ag,HBxAg ELISA kit

人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 Human free haemoglobin,f-Hb ELISA kit

人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human T-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISA kit

人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 Human calcineurin,CaN ELISA kit