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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 貨號:HZS0243
  • 價格: ¥1380/千克
  • 發布日期: 2020-01-09
  • 更新日期: 2025-09-19
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HZS0243
用途 僅限科研
包裝規格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號
是否進口

產品名稱:對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒(實時熒光PCR法)

【儲存條件及有效期】2~8,有效期為12個月。
包裝規格】
50T/100T

產品簡介】

  本產品基于恒溫核酸擴增技術,在恒溫條件下對對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)特異基因片段進行擴增及檢測,并針對各種樣品進行反應體系的優化,可在極短時間內給出準確的檢測結果。

· 可檢測樣本

水產活體:親蝦、蝦苗、魚類、貝類、蟹類

產品特點】

快速檢測:60分鐘內完成檢測,實時熒光檢測儀可判讀結果。

特異性強:針對靶基因的6個區段設計引物,保證擴增特異性。

靈敏度高:比傳統PCR靈敏度高。

操作簡單:一步加樣后,65℃恒溫條件下即可完成擴增。

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒(實時熒光PCR法)【檢驗原理】

本試劑盒根據對蝦傳染性肌肉壞死病毒基因組設計特異性引物和探針,用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

核酸提取液 1.5mL×2 管

酶液 50μL×1 管

反應液 1.0mL×1 管

陽性質控品 50μL×1 管

陰性質控品 250μL×1 管

注:

1)不同批號試劑不能混用。

2)試劑盒內各試劑組份足夠包裝規格所標示的檢測次數。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融少于 7 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

病死或撲殺豬,取分泌物、血液、*、扁桃體、*和淋巴結等

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1.樣品處理(樣本處理區)

1.1樣本前處理

組織樣品:每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g,手術剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;全血樣本:待血凝固后,取血清 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2DNA 提取

1)對上述處理好的標本加入 50μL 核酸提取液,100℃恒溫處理 10min,13,000

rpm 離心 5min,取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

2)DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產的 DNA 提取試劑盒

(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2.試劑配制(試劑準備區)

根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑 ASFV 反應液 酶液

用量(樣本數為 N) 20μL 1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,21uL/管。

3.加樣(樣本處理區) 

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4.PCR 擴增(核酸擴增區)

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25μL;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)

NONE,ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

5.2結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線。

可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現明顯擴增曲線的樣本建議重復試驗,重復試驗結果出現 Ct 值≤35.0 和明顯擴增曲線者為陽性,否則為陰性。

陰性:樣本檢測結果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。

6.檢測方法的局限性

樣本檢測結果不樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;

樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;

陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;

病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;

不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;

試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;

本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

7.質控標準

陰性質控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)檢測試劑盒(實時熒光PCR法)【注意事項】

所有操作嚴格按照說明書進行;

試劑盒內各種組分使用前應自然融化,完全混勻幵短暫離心;

反應液應避光保存;

反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

使用一次性吸頭、一次性手套和各區與用工作服;

樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染;

實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

試劑盒里所有物品應視為污染物對待,幵按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理



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