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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
雞馬立克氏病檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 貨號:HZS0284
  • 價格: ¥1380/千克
  • 發布日期: 2020-01-13
  • 更新日期: 2025-09-19
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HZS0284
用途 僅限科研
包裝規格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號
是否進口

產品名稱:雞馬立克氏病檢測試劑盒(實時熒光PCR法)

檢測方法: 實時熒光 PCR

    格: 50T

保存方式: 2~8℃

 效 期: 1年

    地: 中國

    途: 僅用于科研實驗

雞馬立克氏病檢測試劑盒(實時熒光PCR法)

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雞馬立克氏病檢測試劑盒(實時熒光PCR法)

利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原:ELISA抗原有三類:液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。

純度不高可導致試劑盒的特異性不強,合成抗原一般都是多肽抗原,

試劑盒一般為基因重組抗原??乖兌炔桓?,特異性就不強,

2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性

3、酶結合物,試劑盒的保存時間通常由酶的穩定性決定。

最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液(PBS)

堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了,因為殘留的PBS會抑制一半的酶活性。

TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(OPD對機體有突變作用,所以改用TMB)

 注意事項
1.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區操作。
   1)第一區:樣本制備區。
 2)第二區:模板添加區。
   3)第三區:擴增及產物分析區。
    分區之間*進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區域獨立使用工具,需更換手套和實驗服。
3.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應液中的成分對光敏感,應避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應避免反復凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5.反應結束后,擴增管請置于密封袋內丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內使用。

實驗操作

1.模板制備(樣本制備區)
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產品,具體過程詳見產品說明書。
2.添加模板(模板添加區,放置于冰盒上進行)
剪下所需測試數的已含有反應液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產物分析區)
使用熒光定量PCR儀,熒光基團選擇FAM,淬滅基團選擇TAMRA。

結果分析條件設定
設置基線(baseline):一般情況下,對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle,對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值(threshold):以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線(無規則的噪音線)的zui高點。
結果判斷
陽性:檢測樣本Ct值小于等于35.0,且曲線有明顯的指數增長期;
可疑:檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0,重復一次實驗,如果Ct值仍小于40.0,且曲線有明顯的指數增長期,為陽性,否則為陰性;
陰性:檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。

 



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