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| 產地 | 國內 |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZS0343 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
產品名稱：致病性鉤端螺旋體檢測試劑盒（實時熒光PCR法）
規 格： 50T
檢測方法： 實時熒光 PCR
保存方式： 2~8℃
有 效 期： 1年
產 地： 中國
用 途： 僅用于科研實驗
訂購流程：致病性鉤端螺旋體檢測試劑盒（實時熒光PCR法）
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致病性鉤端螺旋體檢測試劑盒（實時熒光PCR法）
1. 樣品處理（樣本處理區）
1.1 樣本前處理
組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取
1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區）
根據代檢測樣本總數，設所需要的PCR反應管管數為N（N=樣本數+1
管陰性對照+1管陽性對照），體系配制如下表：
試劑
WSSV 反應液
酶液
用量（樣本數為N）
20μl
1μl
3. 加樣（樣本處理區）
將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl，加入相應的
反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR擴增（核酸擴增區）
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內；
5. 結果分析判定
結果分析條件設定
設置基線（baseline）：一般情況下，對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle，對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值（threshold）:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線（無規則的噪音線）的zui高點。
結果判斷
陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數增長期；
可疑：檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復一次實驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數增長期，為陽性，否則為陰性；
陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
