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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HZW0711 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 |
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱：牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）核酸檢測(cè)試劑盒
(RT-PCR
Name ：Diagnostic Kit for Bovine Viral Diarrhea Virus RNA
(RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】48 份/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測(cè)的牛的腸粘膜、腸系膜淋巴結(jié)組織、排泄物等標(biāo)本中牛病
毒性腹瀉病毒 RNA，適用于牛病毒性腹瀉病毒感染的輔助診斷。其檢測(cè)結(jié)果僅供參
考。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒用一對(duì)牛病毒性腹瀉病毒特異性引物，結(jié)合一條特異性熒光探針，用
一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)牛病毒性腹瀉病毒 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床
上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
酶液 50μl×1 管
BVDV 反應(yīng)液 1.0ml×1 管
BVDV 陽(yáng)性質(zhì)控品 50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管
說(shuō)明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 5 次，
有效期 12 個(gè)月。
【適用儀器】
ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ
Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。
【標(biāo)本采集】
病死或撲殺牛，取腸粘膜、腸系膜淋巴結(jié)組織；待檢活牛，取排泄物，放入 1mL50%
甘油生理鹽水中。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò) 6 個(gè)月，標(biāo)
本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱取樣品約 1g，手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.05g 于
研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管
中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100uL 于 1.5mL 滅菌離心管中；排泄物：取 0.05g
于 1.5mL 滅菌離心管中，加入 1mL 生理鹽水渦旋振蕩，8000rpm 離心 2min，取上
清液 100uL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
ELISA常見(jiàn)問(wèn)題：牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)
利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原：ELISA抗原有三類：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng)，合成抗原一般都是多肽抗原，
試劑盒一般為基因重組抗原。抗原純度不高，特異性就不強(qiáng)，
2、抗體特異性和親和力的大小會(huì)影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時(shí)間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過(guò)氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）
堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了，因?yàn)闅埩舻腜BS會(huì)抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)（OPD對(duì)機(jī)體有突變作用，所以改用TMB）
◆ 注意事項(xiàng)
1．本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染，實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
1）第一區(qū)：樣本制備區(qū)。
2）第二區(qū)：模板添加區(qū)。
3）第三區(qū)：擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)。
★ 分區(qū)之間*進(jìn)行物理性隔離，避免人為因素造成的污染。
2．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿戴工作服和乳膠手套，不同區(qū)域獨(dú)立使用工具，需更換手套和實(shí)驗(yàn)服。
3．嚴(yán)格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求在冰盒上操作。
4．反應(yīng)液中的成分對(duì)光敏感，應(yīng)避光保存。試劑使用前要完全解凍，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，推薦使用前離心30秒，并按檢測(cè)頻次將反應(yīng)液以適當(dāng)體積分管保存。
5．反應(yīng)結(jié)束后，擴(kuò)增管請(qǐng)置于密封袋內(nèi)丟棄，當(dāng)日清理，開(kāi)蓋易造成氣溶膠污染，禁止開(kāi)蓋。
6．不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。
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