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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
禽偏肺病毒(aMPV) 試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 型號:50T/盒
  • 貨號:HZW6540
  • 價格: ¥2680/盒
  • 發布日期: 2021-02-19
  • 更新日期: 2025-09-19
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HZW6540
用途 僅用科研
包裝規格 50T/盒
是否進口

【產品名稱】

商品名稱:禽偏肺病毒(aMPV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)


【包裝規格】50 份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測的血清或血漿、疑似污染 REV 的活病

毒疫苗等標本中禽網狀內皮組織增殖病病毒 RNA,適用于禽網狀內皮組織增殖病病

毒感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。

禽偏肺病毒(aMPV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)【檢驗原理】

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

水樣便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區)

1.1 樣本前處理

水樣便 13000rpm 離心 2min,去盡上清;疑似污染的食物用手術剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;疑似污染的水直接取 100μL

1.2 DNA 提取

1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

本試劑盒用一對禽網狀內皮組織增殖病病毒特異性引物,結合一條特異性熒光

探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術對禽網狀內皮組織增殖病病毒 RNA 進行體外擴

增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

名 稱 規 格

酶液 50μl×1 管

REV 反應液 1.0ml×1 管

REV 陽性質控品 50μl ×1 管

陰性質控品 250μl ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

禽偏肺病毒(aMPV)檢測試劑盒(熒光-PCR法) 結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現整體傾斜時,根據分析后圖像調節Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節)、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

1.2 結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數增長曲線;

可疑:檢測通道 35 值≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35 值≤38, 且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

2. 質控標準

陰性質控品:Ct 值>38 或無 Ct 值;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。


反應五要素:

 

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數 個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

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大鼠絲氨酸棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基1(SPTLC1)ELISA試劑盒 Rat(SPTLC1)ELISA Kit

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