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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HXG733 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
鯊魚(yú)源性成分（Shark）試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢主要產(chǎn)品，其特點(diǎn)靈敏性高 、特異性高，判斷陰陽(yáng)性結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)，廠家供貨，品質(zhì)保證，價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電咨詢！
產(chǎn)品名稱：鯊魚(yú)源性成分（Shark）試劑盒(熒光-PCR法)
英文名稱：Shark derived ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)
包裝：50T
【預(yù)期用途】動(dòng)物源性成分廣泛分布于食品、飼料、化妝品等，與人們的生活息息相關(guān)，其中食品和飼料所占的比例*。肉及肉制品摻假成為世界各國(guó)共同關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題，肉食品及其飼料的安全隱患直接關(guān)系到人類的安危。近幾十年來(lái)，以 PCR 技術(shù)為核心的動(dòng)物源性成分檢測(cè)獲得了廣泛應(yīng)用
本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中鯊魚(yú)源性成分的檢測(cè)。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用TaqMan探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，設(shè)計(jì)一對(duì)鯊魚(yú)源性成分基因保守區(qū)特異性引物結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對(duì)狐貍源性成分基因保守區(qū)的DNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，從而達(dá)到快速檢測(cè)之目的。
鯊魚(yú)源性成分（Shark）試劑盒(熒光-PCR法)在PCR 管中加入下列成分：
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成份 |
樣品 |
陽(yáng)性對(duì)照 |
陰性對(duì)照 |
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雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× |
15 uL |
15 uL |
15 uL |
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EMCV 專一性引物對(duì) |
2 uL |
2 uL |
2 uL |
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樣品 RNA |
1-5 uL |
無(wú) |
2 uL |
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EMCV 陽(yáng)性對(duì)照 |
無(wú) |
2 uL |
無(wú) |
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補(bǔ)超純水到 |
28 uL |
28 uL |
無(wú) |
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MMLV-Taq Mix |
2 uL |
2 uL |
2 uL |
狐貍源性成分（Vulpes）試劑盒(熒光-PCR法)操作步驟
取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g，手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中， 8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
DNA 提取
樣本 DNA 的提取采用 DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照；樣品每滿 10 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
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試劑 |
Duck 反應(yīng)液 |
酶液 |
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用量 |
20μL |
1μL |
PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；
4.2 設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul；熒光通道選擇： 檢測(cè)通道
（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。
4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
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步驟 |
循環(huán)數(shù) |
溫度 |
時(shí)間 |
收集熒光信號(hào) |
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1 |
1 cycle |
95℃ |
10min |
否 |
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2 |
40 cycles |
94℃ |
15sec |
否 |
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55℃ |
30sec |
是 |
現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。
判斷a) 檢測(cè)通道 Ct 值≤30，有 FAM 熒光信號(hào)檢出，并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，判斷樣品為陽(yáng)性。
b) 當(dāng) 30值≤35 時(shí)，且有典型的擴(kuò)增曲線時(shí)，則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。再次擴(kuò)增后檢測(cè)體系的Ct 值仍≤35，且有典型的擴(kuò)增曲線，則判定該樣品含有相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。當(dāng)再次擴(kuò)增后，檢測(cè)體系 Ct 值＞35，或無(wú)典型的擴(kuò)增曲線，則判定該樣品不含相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
a) 空白對(duì)照：無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35，未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。
b) 陰性對(duì)照：無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35，未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。
c) 陽(yáng)性對(duì)照：有 FAM 熒光信號(hào)檢出，并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，Ct 值＜30。
d) 以上應(yīng)同時(shí)滿足，否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。
PCR反應(yīng)液請(qǐng)?jiān)诒信渲疲缓笾糜赑CR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。這種冷啟動(dòng)法（Cool Start Method）與熱啟動(dòng)法（Hot Start Method）相結(jié)合，更能有效地減少PCR過(guò)程中的非特異性反應(yīng)，增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性，能得到良好的PCR結(jié)果。
PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會(huì)出現(xiàn)Smear。
鯊魚(yú)源性成分（Shark）試劑盒(熒光-PCR法)特點(diǎn)
1，嚴(yán)格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性
2，產(chǎn)品不斷優(yōu)化，很好的靈敏度；
3，綜合指標(biāo)特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；
4，檢測(cè)驗(yàn)證樣本多樣；
5，專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)為客戶提供個(gè)性化的定*務(wù)；
6，提供食品安全藥物殘留Elisa試劑盒，以及快檢試劑盒
7，完善專業(yè)的售前售后服務(wù)
庫(kù)存均有現(xiàn)貨。
4.產(chǎn)品訂購(gòu)以訂貨當(dāng)日*價(jià)格為準(zhǔn)。
5.所有產(chǎn)品為確保質(zhì)量，出庫(kù)均復(fù)檢。 Wnt1抗體,信號(hào)通路Wnt1抗體 Anti-GLUR3/GRIA 3 PEG3蛋白抗體 小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4抗體 人羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗體 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 性激素結(jié)合球蛋白抗體 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 Anti-Nrf2 Wnt1抗體,信號(hào)通路Wnt1抗體 不同類型抗體的保存指南, 用以避免抗體污染或損傷請(qǐng)不時(shí)核查數(shù)據(jù)表以獲取特定保存建議。如果恰當(dāng)保存和處理, 大多數(shù)抗體應(yīng)能保持活性數(shù)月乃至數(shù)年。 對(duì)于很多抗體而言, 分裝成小等份并凍存于 -20℃ 或-80℃ 是*保存條件。分裝成小等份可*程度減少由凍融造成的損傷, 以及從單個(gè)試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次, 如有剩余, 可將剩余物保存于 4℃。在收到抗體時(shí)，在 10,000 × g 下離心20 秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液, 并以小等份轉(zhuǎn)移至低蛋白結(jié)合微量離心管中。小等份的量取決于實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10μl；等份越小, 儲(chǔ)液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。
公司產(chǎn)品涵蓋ELISA研發(fā)、PCR試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)，各種生化試劑、各種酶類、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室耗材、小型儀器等。此外、上海滬崢還代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國(guó)外各類*公司的產(chǎn)品。
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